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ZJ103 Omni-快速蛋白定量試劑盒(您所在地區可能無法購買,詳情請咨詢:400-0588-030)

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市場價:¥698.00

商城售價:698.00

所得積分:698

貨 號:ZJ103

品 牌:雅酶(EpiZyme)

規格:500次(微孔)

存儲條件:常溫(部分組分-20℃)

供貨時間:現貨

數 量:
庫存9992件
  • 產品詳情

Omni-快速蛋白定量試劑盒

Omni-Rapid Protein Assay Kit

本產品冰袋運輸; BSA標準品 -20保存,其它組分4保存保質期12個月

 

貨號規格

ZJ103    BCA蛋白定量試劑盒    500次(微孔)

 

產品內容

           組分

                    ZJ103

試劑A

100 mL

試劑B

3 mL

BSA標準品(5 mg/mL)

1 mL

 

產品特點

35.png簡單——溫5 min完成顯色反應;

35.png準確——變異系數遠小于考馬斯亮藍染色法;

35.png線性范圍寬——靈敏,檢測范圍:20 ~ 2000 μg/mL;

35.png兼容——與金屬離子、還原劑、螯合劑及去污劑兼容性較好。

 

產品簡介

Omni-快速蛋白定量試劑盒的原理與傳統BCA蛋白定量法類似,但采用了一種不同于BCA(Bicin-choninic Acid)的全新特殊的螯合劑,從而實現了對蛋白質進行快速、穩定、靈敏的濃度測定。其原理是在堿性環境下蛋白質分子中的肽鍵能與Cu2+形成絡合物,將Cu2+還原成Cu+,Cu+與螯合物結合,從而發生顏色反應。本試劑盒中的螯合劑可敏感特異地與Cu+結合,只需室溫孵育5 min即可形成穩定的橙黃色的水溶性復合物,而傳統BCA法則需在37℃下孵育30 min才可完成顏色反應。該橙黃色的復合物在480 nm處有強光吸收值,顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,可根據吸收值的大小來測定蛋白質的含量。本試劑盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作為蛋白質標準品溶液,測定范圍為20 ~ 2000 μg/mL。

 

使用說明

?以微孔酶標儀法為例:

1. 稀釋BSA標準品:

取120 μL蛋白標準品(需完全融解),用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液稀釋至300 μL,使終濃度為2 mg/mL。

★ 注意:為方便起見,也可以用0.9%生理鹽水或PBS緩沖液稀釋標準品。

 

2. 配置顯色工作液:

a. 計算顯色工作液總量:

工作液總量=(BSA標準品樣本個數+待測樣本個數)×復孔數×每個樣本顯色工作液體積

舉例BSA標準品樣本個數為9個,待測樣本個數3個,復孔數3個。

顯色工作液總量=(9個BSA標準品樣本+3個待測樣本)×3個復孔×200 μL(每個樣本工作液體積)=7.2 mL

b. 根據計算出的顯色工作液需要總量,將試劑A和試劑B按照50:1的體積比,配制顯色工作液,充分混勻。

    ★ 注意1)試劑B剛加入試劑A時,會出現灰藍色沉淀,但只需混勻幾秒鐘,沉淀就會消失,形成透亮的綠色溶液;

                     2建議工作液現用現配,在室溫下,工作液會逐漸變為深綠色,但只要在1.5 h內使用,對定量的準確性不會造成影響;

      3)由于加樣可能存在誤差,建議配制BCA工作液時,多配制1 ~ 2個孔。

 

3. 定量檢測 

1. 將稀釋后的標準品按0,1,2,4,6,8,12,16,20 μL分別加到96孔板中,加入用于稀釋標準品的溶液補足到20 μL(為避免槍尖損失,可先補足稀釋液后加入標準品);

孔號

1

2

3

4

5

6

7

8

9

稀釋后的標準品(μL)

1

2

4

6

8

10

15

20

稀釋液(μL)

20

19

18

16

14

12

10

5

0

BSA終濃度(μg/mL)

0

100

200

400

600

800

1000

1500

2000

 

2. 將樣品適當稀釋(可以多作幾個梯度,如2倍、4倍、8倍稀釋),加20 μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取微量時有誤差,標準曲線左側的點可能不夠精確,所以須盡可能地使樣品點落在標準曲線1/2后;

3. 各孔加入200 μL 顯色工作液,充分混勻,蓋上96孔板蓋,室溫孵育5 min,即可進行檢測。

: 由于顏色反應速度較快,須保證在20 ~ 30 min之內完成讀值。如果必須在30 min后才能讀值,可提前加入50 μL 1 M HCL終止反應。

4. 用酶標儀測定每個樣品及BSA標準品的A480,注意要減去空白對照(稀釋液+工作液)的A480。

5. 繪制標準曲線,計算樣品中的蛋白濃度。

★ 注意:數據處理時需要去除明顯錯誤的值。待測樣品濃度可以從標準曲線中查得, 實際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數。如果是計算機繪制的曲線,可以從計算機給出的線性方程 式計算出待測樣品的濃度。

 

注意事項

1. 本產品可以采用酶標儀(微孔檢測法)或者分光光度計(試管檢測法)測定蛋白濃度,如使用普通的分光光度計測定,需根據比色皿的最小檢測體積,適當加大BCA工作液的用量使不小于最小檢測體積,樣品和標準品的用量可相應按比例放大也可不變。使用分光光度計測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著減少;

2. 建議每次測定蛋白樣品時,都須繪制標準曲線,以獲得準確數據;

3. BSA標準品的稀釋液需與待測樣品的稀釋液一致(可用1×PBS或0.9%生理鹽水進行稀釋);

4. 完成室溫孵育5 min后,須在20 ~ 30 min內完成檢測,否則會影響蛋白定量的準確度;

5. 如待測樣品中含較多的干擾物質(具體見附表),可采用其它蛋白定量產品;

6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;

7. 本產品僅限科研使用。

 

 

干擾物質附表

 

化合物

耐受濃度

化合物

耐受濃度

鹽/緩沖液

去垢劑

ACES, pH 7.8

25 mM

Brij-35

5.0%

Bicine, pH 8.4

20 mM

Brij-58

1.0%

Borate

50 mM

Na Deoxycholate(DOC)

5.0%

Calcium chloride in TBS, pH 7.2

10 mM

Octyl β-glucoside

5.0%

Na-Carbonate/Na-Bicarbonate, pH 9.4

0.1 M

Span-20

0.5%

Cesium bicarbonate

100 mM

TritonX-100

5.0%

CHES, pH 9.0

100 mM

Triton-X-114, riton-X-305,Triton-X-405

1.0%

Na-Citrate

75 mM

Tween-20, Tween-60, Tween-80

5.0%

MOPS, pH 7.2

100 mM

Zwittergent 3-14

1.0%

Cobalt chloride in TBS, pH 7.2

0.8 mM

螯合劑

EPPS, pH 8.0

100 mM

EDTA

10 mM

Ferric chloride in TBS, pH 7.2

10 mM

Sodium citrate

200 mM

Glycine?HCl, pH 2.8

100 mM

還原劑

Guanidine?HCl

4 M

N-acetylglucosamine in PBS, pH 7.2

10 mM

HEPES, pH 7.5

100 mM

糖類

Imidazole, pH 7.0

12.5 mM

Glucose

10 mM

MES, pH 6.1

100 mM

其它

MES (0.1M), NaCl (0.9%), pH 4.7

未稀釋

Acetone

10%

Nickel chloride in TBS, pH 7.2

10 mM

Acetonitrile

10%

PBS; Phosphate (0.1 M), NaCl (0.15 M), pH 7.2

未稀釋

Aprotinin

10 mg/L

DMF, DMSO

10%

PIPES, pH 6.8

100 mM

DMSO

10%

RIPA lysis buffer: 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.5%

DOC, 1% NP-40, 0.1% SDS, pH 8.0

未稀釋

Ethanol

10%

Glycerol (fresh)

10%

Hydrochloric acid

100 mM

Sodium acetate, pH 4.8

200 mM

Leupeptin

10 mg/L

Sodium azide

0.2%

N/A

Sodium bicarbonate

100 mM

Sodium chloride

1 M

Sodium citrate, pH 4.8 or pH 6.4

200 mM

Sodium phosphate

100 mM

Tricine, pH 8.0

25 mM

Triethanolamine, pH 7.8

25 mM

Tris

250 mM

TBS: Tris (25 mM), NaCl (0.15 M), pH 7.6

未稀釋

Tris (25 mM), Glycine (192 mM), pH 8.0

1:2稀釋


商家信息
愛生物自營

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